| Kromatográfia | | Nyomtatás | |
|
A kromatográfia kifejezés a görög „chroma” (szín) és a „graphia” (írás) szavak összetételéből eredeztethető és bizonyos elválasztástechnikai módszerek gyűjtőneveként szolgál. A XX. század elején e módszereket a mintaelőkészítés részeként mintatisztítási, preparatív műveletként alkalmazták, majd a század közepétől ezeken túl, önálló analitikai módszerként is tekinthetünk ezekre az eljárásokra. A kromatográfiás eljárások olyan elválasztástechnikák, amelyek mindig egy álló- és mozgófázis közötti dinamikus anyagátvitelen alapulnak. A szétválasztás általános elvi alapja az, hogy a szétválasztandó komponenseket tartalmazó elegy egyes összetevői különböző mértékben kötődnek a fázisokhoz. Az egyik fázis mindig egy áramló, vagy mozgó fázis (mobilfázis). A másik mindig egy álló fázis (stacioner fázis). Rengeteg módja van annak, hogy valamilyen rendszer alapján osztályozzuk az egyes kromatográfiás módszereket. Rendszerezhetjük őket például az állófázis geometriája szerint. Ezek alapján megkülönböztetünk planáris- és oszlopkromatográfiás módszereket. A legelterjedtebb besorolás azonban a mozgófázis halmazállapota alapján kategorizálja a kromatográfiákat. Amennyiben a mozgófázis folyadék, akkor folyadékkromatográfiáról, ha pedig gáz halmazállapotú akkor gázkromatográfiáról beszélünk. Az előbbieknél jóval kevésbé elterjedt egy harmadik típus: a szuperkritikus fluidkromatográfia. Az alkalmazott lépték és cél szerint besorolhatjuk őket mint különböző léptékű analitikai (nano, kapilláris, standard stb.) és preparatív kromatográfiás eljárásokat. Folyadékkromatográfia A folyadékkromatográfia az oldat komponenseinek elválasztásához mozgófázisként folyadékot alkalmaz. Az állófázist (az elterjedtebb oszlopkromatográfiás eljárásoknál) úgy kell elképzelni, mint egy néhány milliméter átmérőjű és kb. 5-25 cm hosszú csőszerű oszlopba töltött porózus szerkezetű, apró (néhány mikrométer átmérőjű) szemcsékből álló töltetet. A legelterjedtebb folyadékkromatográfiás eljárások esetén a mozgófázisként alkalmazott folyadékot folyamatosan áramoltatják át a kromatográfiás oszlopon. A meghatározandó komponenseket együttesen tartalmazó és kromatografálásra előkészített mintából egy jól definiálható kis mennyiséget juttatnak (injektálnak) az áramló mozgófázisba. Ez a mozgófázisba juttatott, oldott állapotban lévő, de dugószerűen áramló anyag a mozgófázisban „sodródva” ér el az állófázist tartalmazó oszlopig. Ahogy a minta az oszlopon keresztülhalad annak komponensei elválasztódnak egymástól. Ez a szeparáció azért következik be, mert a különböző komponensek eltérő mértékben (reverzibilis módon) rövidebb-hosszabb ideig megkötődnek az állófázison. Ennek következtében lemaradnak a mozgófázis áramlási sebességéhez képest. Mivel a megkötődés komponensenként eltérő mértékű, ezért az ún. visszatartás (retenció) is eltérő lesz. A komponensek állófázison történő megkötődése reverzibilis és nem az oszlop egy adott pontján valósul meg, hanem az áramlás során, folyamatosan, szukcesszív módon bekövetkező, dinamikus folyamatként játszódik le. A kromatográfiás „futtatás” akkor tekinthető befejezettnek, ha végül a leglassabban haladó komponens is elhagyja az oszlopot, azaz eluálódik. A visszatartás mértékét számos tényező befolyásolja, vagyis az elválasztás mértéke az oldott anyagoknak a mozgó- és az állófázissal kialakuló komplex kölcsönhatásainak erősségétől függ. Az álló- és mozgófázis, valamint a szétválasztandó komponensek között fellépő kölcsönhatások elsősorban a mozgófázisok és állófázisok különféle típusainak megválasztásával befolyásolhatók. |
